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STR鉴定

作者:小编 更新时间:2023-08-03 点击数:

细胞系错误鉴定问题已有50年历史,基于国际细胞库的分析数据显示:1984年细胞错误鉴定率为35%,1999年为18%,直到最近几年,应用于生物医学领域的细胞系需要鉴定的问题仍然很少有人关注。咨询电话:13816144967(微信同号)

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STR(Short Tandem Repeat,短串联重复序列)是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列,其核心序列重复次数存在个体差异多态性,因此STR也被称为细胞的DNA指纹。

近年来,大量研究表明STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效和准确的方法之一,STR基因分型应用于细胞鉴定已被ATCC等机构强烈推荐。美国的ATCC细胞库、德国的DSMZ细胞库以及日本的JCRB细胞库等为STR分型提供了各细胞株的数据供比对。越来越多的杂志在投稿时要求撰稿人提供细胞STR分析数据,STR已被ATCC等机构作为细胞鉴定的金标准。

鉴定方法:

STR基因位点由长度为3~7个碱基对的短串连重复序列组成,可通过PCR(聚合酶链式反应)来检测。STR基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分,在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法,即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。咨询电话:13816144967(微信同号)

什么时候需要细胞系STR鉴定?

• 发表文章或申请课题经费前;

• 使用细胞进行临床治疗(试验)前;

• 准备冻存保种或已冻存多年的细胞;

• 一个涉及到细胞试验项目开始/结束时;

• 新得到的细胞或实验室培养5代以上的细胞;

• 细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大;

• 异体细胞移植后嵌合情况检查。

这样将避免由于细胞系交叉污染或身份误认,导致的金钱、时间的浪费和无效实验数据的产生。

样品要求:

活细胞:T25培养瓶,60%-70%密度,细胞数>106个,寄出前灌满培养基封口膜密封盖子,常温运输。

细胞沉淀/冻存细胞:细胞数量需≥106,干冰运输。

DNA样本:OD260/OD280=1.8~2.0,DNA浓度≥50ng/uL,DNA体积≥20uL。咨询电话:13816144967(微信同号)