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白色念珠菌基因编辑

作者:小编 更新时间:2023-08-03 点击数:

白色念珠菌(Monilia albican),是一种真菌,通常存在于正常人口腔,上呼吸道,肠道及阴道,它属于导致人类高死亡率的四大病原真菌之一,是世界上第二常见的机会性真菌感染因子。白色念珠菌是人体肠道微生物群(共栖真菌)的一部分,但它也引起健康个体的粘膜感染和免疫防御能力减弱的个体(免疫功能低下的个体和接受器官移植、接受严重手术或遭受严重创伤的患者)的严重机会性感染。咨询电话:13816144967(微信同号)

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传统λRed同源重组法

白色念珠菌基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点:首先,由于RecBCD具有核酸外切酶活性,线性的打靶DNA将被降解,打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组;其次,打靶片段需要较长的同源臂,往往长达几百个碱基,而且同源重组效率低,往往不能得到所需的重组子。

CRISPR/Cas9基因编辑技术:

CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA(guide RNA)来识别目的基因组序列,并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链,形成双链断裂,损伤后修复会造成基因敲除或敲入等,最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法,CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快,无痕,结果更准确,非常便于您开展后续的实验研究。

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