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鸡冠状病毒灭活检测

作者:小编 更新时间:2023-08-03 点击数:

鸡传染性支气管炎是鸡的唯一的一种冠状病毒病,是由冠状病毒科冠状病毒属鸡传染性支气管炎病毒(IBV)引起的,该病对养鸡业危害较大,应高度重视其防治工作。流行特点是病鸡为主要传染源,病毒在病鸡粪便中可存活12~56天。病鸡的粪便、口鼻分泌物、呼出的气体,被污染的空气、用具、饲料和饮水,会通过呼吸道、消化道传染给易感鸡。一年四季均可发生,以冬季发病较多。咨询电话: 13816144967 (微信同号)

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鸡冠状病毒灭活检测方案:

A、实验资料:SPF鸡胚,并自行孵化至10日龄。鸡传染性支气管炎病毒采用 IBV QXL87株种毒。实验所用稀释液:生理盐水(0.9% NaCl)高压灭菌,并保管于4℃冰箱。

B、实验对象:1号保管液(灭活保管液)、2号保管液(非灭活型病毒保管液)。

C、实验内容:分为两局部

不同病毒保管液灭活效果的鸡胚感染比拟

将制备好的鸡传染性支气管炎病毒 QXL87株种毒添加至保管液中,按1(病毒原液):10(保管液) 比例,置室温18-26℃灭活45min;将灭活好的病毒液接种SPF鸡胚停止灭活检验,同时对收获尿囊液停止鸡传染性支气管炎病毒核酸检测,参照GB/T 23197-2008 鸡传染性支气管炎诊断技术,运用RNA提取试剂盒提取RNA,并运用禽源冠状病毒核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)检测。

鸡冠状病毒灭活检测结果:

选择适宜的病毒保管液对病毒停止灭活,按兽药典请求停止灭活检验。将灭活好样品按尿囊腔接种方式接种10日龄SPF鸡胚,每个样品接种10枚鸡胚,0.1 mL/枚,置于37℃培育箱中培育144 h,弃去24 h死亡的鸡胚,察看记载24-144 h鸡胚死亡状况和接种后有病变的活胚数的数量。察看鸡胚病变,同时收获尿囊液停止PCR检测,即为第一代接种核酸检测结果。然后将第一次收获的四个尿囊液停止二次鸡胚接种,培育144h后收获尿囊液停止PCR检测,即为第二代接种核酸检测结果。咨询电话: 13816144967 (微信同号)