细胞STR鉴定检测
STR即短串联重复序列(Short Tandem Repeats),也称微卫星DNA(microsatellite DNA),是一段包含1-6bp的重复DNA序列。STR广泛存在于原核动物和真核动物中,人类中也不例外,约占人类基因组的3%。由于其多态性和高突变率,STR在生物学研究中得到了广泛的应用,又被称为细胞的DNA指纹。咨询电话:13816144967(微信同号)
由于STR技术的高灵敏度、自动化程度高、准确快速、重复性好等优点,STR基因分型已被作为金标准应用于细胞鉴定,由于细胞系交叉污染或错误辨识而导致研究错误、结果不可重复等情况的存在,因此建议在实验开展前进行细胞的STR鉴定分析。
细胞STR鉴定即通过STR信息建立细胞系的遗传特性,通过STR鉴定来检测细胞是否发生交叉污染或者误认的情况。STR 基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列拷贝数的不同来区分,在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法,即可根据所得的STR分型结果与细胞STR数据库比对,从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。
STR基因位点由长度为3~7个碱基对的短串连重复序列组成,这些重复序列广泛存在于人类基因组中,可作为高度多态性标记,被称为细胞的DNA指纹。 STR基因座位上的等位基因可通过PCR扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分,在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别,随后通过一定的计算方法,即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。 STR的鉴定结果能证明以下问题: 1. 是否为人源细胞;2. 是否为标准细胞系;3. 是否存在物种内交叉污染。据统计,约18%~30%细胞系被交叉污染或错误辨识,使用该细胞可能导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果等。 2009年起,NIH和ATCC呼吁研究者对细胞进行STR鉴定并着手建立细胞STR数据库。如今,细胞STR鉴定已是鉴别细胞身份及交叉污染的金标准。多数权威期刊也要求作者投稿时提供细胞STR鉴定证明。《中国药典》中明确规定,新建细胞系/株、细胞库和生产终末细胞应进行鉴别试验,以确认为本细胞,且无其他细胞的交叉污染。
什么时候需细胞STR鉴定?
• 当实验室引入新的细胞系
• 细胞来源于组织 – 原代细胞
• 文章发表,国外期刊杂志要求
• 细胞功能不正常
• 细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大
• 细胞已连续培养2个月时,实验室细胞常规定期鉴定
• 当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系最好先鉴定以排除交叉污染的可能
咨询电话:13816144967(微信同号)