肠道病毒灭活检测

肠道病毒是一大类病毒的总称，它们的共同特点是通过消化道感染和传播，主要包括脊髓灰质炎病毒，柯萨奇病毒、埃可病毒和新型肠道病毒。咨询电话: 13816144967 (微信同号)

肠道病毒具有传染性，人肠道病毒主要通过消化道感染人体，主要引起神经系统疾病、口咽和呼吸道疾病、心血管疾病和眼病等，严重者可危及生命。有趣的是，肠道病毒很少引起胃肠道疾病，它们主要引起的是肠道外疾病，最常见的疾病包括脊髓灰质炎(也称为小儿麻痹症)、无菌性脑膜炎、手足口病和心肌炎等。

肠道病毒EV71感染是人肠道病毒的一种，简称为EV71，常引起儿童手足口病、病毒性咽峡炎，重症患儿可出现心肌炎、肺水肿、脑炎等，统称为肠道病毒EV71感染疾病。该病多发生于儿童，尤其是3岁以下婴幼儿多发，少数病情较重，严重的会引起死亡。

V71灭活疫苗（人二倍体细胞）灭活工艺验证

目的：

对肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）灭活疫苗（人二倍体细胞）的灭活工艺进行验证。咨询电话: 13816144967 (微信同号)

方法：

取3批次经甲醛灭活的EV71灭活病毒收获液样品,分别连续盲传4代,并设病毒对照盲传4代。观察每代次样品的细胞病变情况,采用微量滴定法检测病毒感染性滴度,ELISA法检测EV71特异抗原含量,实时定量PCR法检测病毒核酸水平及病毒负链产生情况。

结果：

3批灭活的疫苗病毒收获液样品经4次盲传后,各代次均未出现明显的细胞病变,经微量滴定法均未检测到EV71感染性滴度。灭活的病毒收获液盲传至第2代时,病毒负链检测已为阴性;至第3代时,EV71抗原检测为阴性;至第4代时,病毒核酸检测为阴性。病毒对照经盲传4代后,各代次均出现明显细胞病变;自第2代开始,感染性滴度维持在106~107 CCID50/ml,抗原含量为200~370 U/ml,且均可检测出明显的病毒核酸及病毒负链增殖。

结论通过经典的＂细胞上盲传3代＂的检测方法,并结合实时定量RT-PCR对病毒核酸和负链进行检测,证实经甲醛灭活的EV71灭活疫苗样品已完全灭活。

EV71 灭活疫苗具有良好的免疫原性

接种EV71灭活疫苗可刺激机体产生抗EV71的免疫力，用于预防EV71感染所致的 手足口病。EV71灭活疫苗接种后28天，血清抗体阳转率为88.1%～100%。目前关于EV71疫苗免疫持久性研究数据有限，根据对Ⅲ期临床研究对象的跟踪观察，接种后56天至8个月，EV71中和抗体滴度有所下降，8～14个月抗体水平处于相对稳定状态，但抗体阳性率未见下降。免疫后两年的观察结果显示，中和抗体水平和临床保护效力仍然维持在较高水平。接种2剂次EV71灭活疫苗对于EV71感染相关 手足口病的保护效力为90%～97.45%，对于EV71引起的相关疾病的保护效力为80.4%～88.0%。对柯萨奇病毒A16型（CV A16）和其他肠道病毒感染 手足口病无保护效力。不同基因型毒株的免疫原性研究结果显示，疫苗株对EV71不同基因型和亚型具有交叉保护作用。咨询电话: 13816144967 (微信同号)