猫疱疹病毒灭活检测

猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus type 1,FHV-1)是引起猫科动物发生猫传染性鼻气管炎(Feline infectious rchinotracheitis,FIR)的病原,是疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科、水痘疱疹病毒属的双链DNA病毒。该病毒在世界范围内普遍流行,具有高度种属特异性。FHV-1感染动物后,常潜伏于动物体的三叉神经节内,极易形成隐性感染并终生排毒,呈周期复发,对猫及猎豹、虎等野生猫科动物的健康造成严重威胁。在我国宠物猫饲养量与日俱增的今天,饲养场等小环境中一旦存在带毒猫,便会造成易感幼猫的不断感染,将会导致该病在该地区不间断流行。咨询电话: 13816144967 (微信同号)

猫疱疹病毒灭活检测项目：

FHV-1病毒灭活检测、FCV、支原体 、Bb、衣原体。

猫疱疹病毒灭活检测方法：

本实验以自主分离鉴定的毒株制备疫苗,为研发具有自主知识产权的疫苗奠定基础。在本研究中,以本实验室前期分离鉴定的FHV-1 CH-B株为种毒株,扩大培养后获得病毒效价为10~(7.84) TCID_(50)/m L的FHV-1 CH-B株病毒液。

选取不同浓度的甲醛、二乙烯亚胺(BEI)和β-丙内酯(BPL)分别对FHV-1 CH-B株病毒液进行灭活,筛选灭活剂,最终灭活条件被确定为:FHV-1 CH-B株病毒液与体积分数为0.2%甲醛混匀后,于120r/min的37℃恒温摇床中灭活48 h。将甲醛灭活后的FHV-1 CH-B株病毒液分别与AL(OH)_3佐剂和CRM佐剂进行混匀,注射到小鼠体内,通过检测小鼠体内血清抗体(IgG)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量,以及中和抗体效价来筛选佐剂,确定AL(OH)_3佐剂为FHV-1 CH-B株病毒液灭活疫苗制备的佐剂。

FHV-1 CH-B株病毒液经甲醛灭活后,与AL(OH)_3佐剂按9:1比例混匀,制备灭活疫苗。灭活疫苗经实验室检验合格,无污染,注射小鼠和猫均未出现不良反应。将病毒含量为10~(7.84)TCID_(50)/m L、10~(6.84)TCID_(50)/m L、10~(5.84)TCID_(50)/m L的FHV-1灭活疫苗,分别以皮下注射方式,按1m L/只的剂量免疫实验猫,每7 d采集猫外周血分离血清,采用间接ELISA方法测定血清抗体(IgG)含量、白细胞介素4(IL-4)、IFN-γ、中和抗体等指标,第21 d进行二次免疫。第42 d利用实验室已建立的FHV-1感染幼猫模型进行动物攻毒试验,根据实验猫的体温、体重、临床症状、排毒量、组织病变情况,筛选最小免疫剂量。结果表明,病毒滴度为10~(7.84)TCID_(50)/m L的FHV-1灭活疫苗,对实验猫的保护率为100%(5/5)。对灭活疫苗进行安全性试验,通过14 d的临床观察,各组实验猫的精神状态、采食情况、主要生化指标无异常变化,且未见不良反应,由此证明自制灭活苗安全性良好。咨询电话: 13816144967 (微信同号)

本研究成功制备了FHV-1 CH-B株灭活疫苗,经实验室检验及和安全性评价,证明FHV-1 CH-B株灭活疫苗对FHV-1感染幼猫具有预防作用,为FHV-1疫苗的进一步研究提供有效参考数据。

猫疱疹病毒灭活检测样品采集注意事项：

除有特殊说明外，所有实验用样本采集，保存与运输均应符合NY/T 541 兽医诊断样品采集，保存与运输技术规范。

采集宠物猫的口腔或鼻腔分泌物，加入样品10%体积的PBS稀释，过0.22μm过滤器,收集滤液,8000g离心10min，取上清液待检查。

猫疱疹病毒灭活检测周期：

通常情况下是在10-12个工作日之内。咨询电话: 13816144967 (微信同号)