呼吸道合胞病毒(RSV)灭活检测
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)属于副黏病毒科的肺病毒属(Pneumovirus),只有一种血清型。主要引起6个月以下婴儿患细支气管炎和肺炎等下呼吸道感染,以及较大儿童和成人的鼻炎、感冒等上呼吸道感染。咨询电话: 13816144967 (微信同号)
呼吸道合胞病毒灭活检测项目:
甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。
RSV病毒灭活检测方法:
直接免疫荧光法、间接免疫荧光法、桥联酶标免疫法、ELISA法、病毒分离法、PCR法及核酸杂交法等。
呼吸道合胞病毒灭活方案:
下面以直接免疫荧光法为例,1.标本的采集将配套的绒植拭子经鼻腔插人到达鼻咽部约7~8cm。来回旋转2~3次后迅速抽出拭子,放人加有3mLPBS(10×)的塑料试管中,盖上盖子送检。
2.标本处理将绒植拭子标本在漩涡混匀器上轻微混匀3下(约30S),见浑浊后去掉绒植拭子。以700×g离心10rain。弃去上清液(留约100~150IxL),吸管吹打混匀,形成混浊细胞悬浮液。
3.标本制片标本点样在载玻片上(约10~l5L),电吹风机冷风下风干10~15min至干燥,浸没在冷丙酮中固定10min,取出晾干。
4.标本反应每份标本分别加D3试剂1滴(25),必须完全覆盖待测标本。将载玻片放在湿盒中置于37℃培养箱(或放在泡沫上置于37℃水浴箱)孵育15~30min。载玻片用PBS冲洗1次,后浸没在PBS中洗2次(PBS不能重复使用)。
5.标本观察玻片中央加1滴封闭液,盖上盖玻片。
呼吸道合胞病毒灭活检测注意事项:
不同季节呼吸道病毒感染情况分析经检验,不同季节呼吸道病毒的感染率不同(P<0。05)。由于本研究标本在12月~5月问采取,经历了冬季、春季。随着气温的升高,病毒的检出率逐渐降低,冬季要明显高于春季。另外,虽然随着气候变暖,RSV的检出率降低,但在7种病毒中仍占主要地位;PIV3检出率增加的幅度较大。咨询电话: 13816144967 (微信同号)